Identifiant pérenne de la notice : 215975235
Notice de type
Notice de regroupement
Note publique d'information : L’étude de l’identification des défauts moléculaires mis jeu dans les pathologies
héréditaires plaquettaires est d’un apport considérable pour améliorer la compréhension
des mécanismes physiologiques. Durant ma thèse, j’ai étudié les plaquettes d’individus
appartenant à deux familles distinctes souffrant de dysfonctions plaquettaires à l’origine
d’hémorragies sévères. Par séquençage entier des exons, nous avons identifié pour
la première famille une mutation du gène RASGRP2 à l’origine de la substitution Gβ48W
empêchant l’activation de CalDAG-GEFI. Les plaquettes des individus porteurs de la
mutation à l’état homozygote ont une capacité réduite à activer Rap1 et l’intégrine
αIIbß3 en réponse à de faibles doses d'agonistes. La présence d'un allèle non muté
(hétérozygotie) est suffisante pour prévenir lessaignements mais ne permet pas de
rétablir totalement une fonction plaquettaire normale. La deuxième famille est porteuse
d’une mutation du gène FERMT3 (pN54RfsX142) conduisant à une absence complète de kindline-3.
Les plaquettes homozygotes pour cette mutation sont incapables d’activer l’intégrine
αIIbß3. Elles forment des filopodes et desnodules d’actine mais ne peuvent étendre
des lamellipodes même en présence de Mn2+. La kindline-3 s’est révélée essentielle
à la régulation de l’activité de Cdc4β et au réarrangement au cytosquelette d'actine
lors de la signalisation «outside-in» de l’intégrineαIIbß3. Seule la kindline-3 a
jusqu’ici été impliquée dans l'activation des intégrinesplaquettaires. Nous mettons
en évidence la présence de kindline-2 dans les plaquettes et les mégacaryocytes humains.
Des localisations différentes ont été mises en évidence pour ces deux kindlines. Dans
le mégacaryocyte la kindline-2 se situe dans les zones d’adhérence focales et s’associe
préférentiellement avec les intégrines ß3. Dans les plaquettes, seule la kindline-3
est présente dans nodules d’actine. Ces résultats sont en faveur de rôles non redondants
des kindlines-2 et -γ et d’une implication potentielle de la kindline-2 dans la mégacaryopoïèse.
Note publique d'information : Inherited platelet disorders are rare diseases that give rise to severe bleeding when
platelets fail to fulfill their hemostatic function upon vessel injury. Identifying
the molecular mechanisms involved brings important insight into platelet pathophysiology.
During my PhD, I studied platelets isolated from members of two families suffering
severe bleedings among those one had no established diagnosis. In the first family,
using whole exome sequencing, we identified a RASGRP2 mutation causing a G248W substitution
leaving CalDAG-GEFI inactive. Platelets from individualscarrying the mutation exhibit
a reduced ability to activate Rap1 and to perform proper Inherited platelet disorders
are rare diseases that give rise to severe bleeding when platelets fail to fulfill
their hemostatic function upon vessel injury. Identifying the molecular mechanisms
involved brings important insight into platelet pathophysiology. During my PhD, I
studied platelets isolated from members of two families suffering severe bleedings
among those one had no established diagnosis. In the first family, using whole exome
sequencing, we identified a RASGRP2 mutation causing a G248W substitution leaving
CalDAG-GEFI inactive. Platelets from individuals carrying the mutation exhibit a reduced
ability to activate Rap1 and to perform proper αIIbß3 integrin inside-out signaling
in response to low doses agonists. The presence of a single normal allele is sufficient
to prevent bleeding but does not allow normal platelet function. integrin inside-out
signaling in response to low doses agonists. The presence of a single normal allele
is sufficient to prevent bleeding but does not allow normal platelet function. Members
of the second family carry a FERMT3 mutation leading to a completekindlin-3 deficiency
(pN54RfsX142). Platelets from the homozygous patient are unable to perform proper
integrin αIIbß3 activation. We now observe that kindlin-3 deficient platelets form
filipodia and actin nodules but are unable to extend lamellipodia even in presence
of Mn2+. We demonstrate that kindlin-3 is essential for Cdc42 activity regulation
and actincytoskeleton remodeling during αIIbß3 integrin outside-in signaling To date,
only the kindlin-3 has been involved in integrin activation. We show that kindlin-2
is present in human platelets and megakaryocytes. Both kindlins exhibit distinctlocalizations.
In megakaryocytes, kindlin-2 specifically localizes within focal adhesion and associates
preferentially with ß3 integrins. In platelets, unlike kindline-2, kindline-3 is located
in actin nodule. All together these data argue in favor of specific roles played by
each kindlins and a possible implication of kindlin-2 in megakaryocytopoiesis.
paprika.idref.fr
data.idref.fr
Documentation
