Note publique d'information : Le système de sécrétion de type VI (SST6) est un complexe multi-protéique permettant
l’export d’effecteurs. Ce mécanisme est impliqué à la fois dans la virulence envers
les cellules eucaryotes, dans l’activité antibactérienne mais également dans l’acquisition
d’ions présents dans ’environnement. Ainsi, le SST6 joue un rôle important dans l’adaptation
et la compétition, éléments essentiels dans la colonisation et la persistance au sein
d’une niche écologique. Actuellement, très peu d’études portent sur l’importance du
SST6 chez des souches environnementales, contrairement aux nombreuses études portant
sur des pathogènes tels que Pseudomonas aeruginosa, Burkholderia thailandensis, Vibrio
cholerae ou Escherichia coli. Mon sujet de recherche avait pour objectif de caractériser
le ou les rôles du SST6 de la souche environnementale Pseudomonas fluorescens MFE01.
Ces travaux ont permis d’appréhender certaines fonctions du SST6 de cette souche.
Le génome de MFE01 ne comporte qu’un seul cluster de gènes du SST6 où sont regroupés
les gènes codant pour la machinerie du SST6 (le « core-component ») à l’exception
des gènes hcp. Les protéines Hcp sont des éléments structuraux du SST6 dont elles
forment le tube interne qui permet le transfert des effecteurs. Différents gènes hcp
sont disséminés sur le chromosome et parmi ces « hcp » orphelins, hcp2 et hcp3 codent
respectivement pour les protéines Hcp2 et Hcp3. Ces deux Hcp sécrétées par le SST6,
sont associées à l’activité antibactérienne de MFE01 sur différentes souches pathogènes
et environnementales, tels que P. aeruginosa, P. fluorescens MFN1032 et Pectobacterium
atrosepticum. La protéine Hcp1, codée par le gène orphelin hcp1, est impliquée dans
l’inhibition de mobilité de souche compétitrice. Hcp1 permettrait la sécrétion d’au
moins deux toxines qui perturberaient l’assemblage du flagelle. Chez MFE01Δhcp1 et
MFE01ΔtssC (TssC est un élément de la gaine contractile du SST6), ces toxines seraient
accumulées dans le cytoplasme, inhibant ainsi ’assemblage de leur propre flagelle.
La surproduction du régulateur FliA, qui contrôle notamment l’assemblage du filament
flagellaire, restaure la mobilité chez ces deux mutants. En parallèle, le SST6 de
la souche MFE01 est essentiel à la formation et la maturation de biofilm mais également
à la compétition bactérienne en biofilm mixte. Ce système interviendrait dans la communication
bactérienne indispensable au comportement social, requis lors de l’élaboration des
biofilms.
Note publique d'information : Type VI secretion system (T6SS) is a multiproteic apparatus that secreted proteinaceous
effectors. T6SS participate in a variety of functions, whose eukaryote virulence,
antibacterial activity or metal ion uptake. These capacities conferring an advantage
in adaptation and competition, crucial to colonization or persistence within ecological
niche. As well, only a few studies have focused on the T6SS functions of environmental
strains, contrary to numerous studies dealing with pathogens as Pseudomonas aeruginosa,
Burkholderia thailandensis, Vibrio cholerae or Escherichia coli. The purpose of my
research project was to characterize the T6SS function(s) of the environmental strain
Pseudomonas fluorescens MFE01. This work had led to understand the various functions
of T6SS of MFE01 strain. This strain has a single T6SS cluster where all the core
component proteins were gathered, except hcp genes. Three orphan hcp genes where found
and are scattered in genome. Hcp proteins form the inner tube allowing effectors secretion.
Both Hcp2 and Hcp3 proteins were involved in antibacterial activity on pathogens or
environmental strains like P. aeruginosa, P. fluorescens or Pectobacterium atrosepticum.
Characterization of Hcp1 proteins role constituted a major focus of this project.
Hcp1 proteins participate to motility inhibition of competitive strains through T6SS.
Hcp1 may be associated with secretion of at least two toxins perturbing the flagellar
filament assembly. In MFE01Δhcp1 and MFE01ΔtssC mutants (Tss is a contractile sheath
constituent), these toxins may be accumulated into cytoplasm and perturb assembly
of their own flagella. Interestingly, overproduction of FliA flagellar regulator,
which controls assembly of flagellar filament, restores motility of both mutants.
Simultaneously, T6SS of MFE01 strain contributes to maturation and biofilm formation
but also in bacterial competition within mixed biofilm. T6SS may be a mean of bacterial
communication and thus coordinate a social behavior, primordial for biofilm formation.