Note publique d'information : Les complexes de ruthénium(II) font l’objet d’un intérêt croissant en tant que photosondes
du matériel génétique ou nouvelles drogues en photothérapie anti-cancéreuse. Les complexes
contenant des ligands TAP (1,4,5,8-tétraazaphénanthrène) sont capables sous l’action
d’une irradiation lumineuse, de génèrer spécifiquement un photoadduit avec la guanine.
Cette photoréactivité constitue une stratégie prometteuse pour contrôler l’expression
d’un gène. Toutefois, le manque de sélectivité de ce type de photoréaction bloque
leur potentiel thérapeutique. Afin de surmonter cet obstacle, nous avons attaché le
complexe de ruthénium à l’extrémité d’un oligonucléotide. Cette approche repose sur
l’utilisation des propriétés intrinsèques de reconnaissance spécifiques des oligonucléotides
vis-à-vis d’une cible acide nucléique. Pour préparer les conjugués, nous avons utilisé
la formation d’un lien éther d’oxime en mettant au point une méthode douce et efficace
de conjugaison, optimisée dans des conditions conformes aux exigences physiologiques.
Nous avons préparé différents conjugués à partir des complexes [Ru(TAP)3]2+ et [Ru(TAP)2Phen]2+,
ancrés indifféremment à l’extrémité 3’ ou 5’ des oligonucléotides, afin d’en étudier
le potentiel photochimique. En illuminant ces nouveaux conjugués dans le visible,
nous avons mis en évidence la formation spécifique d’un photopontage entre une guanine
de l’acide nucléique ciblé et le complexe de ruthénium. Nous avons également étendu
notre procédé en ancrant le complexe [Ru(TAP)2Phen]2+ à des peptides vecteurs
Note publique d'information : The Ru(II) complexes have found widespread interest as luminescent DNA probes, or
new phototherapeutic agent against cancer. Complexes containing highly π-deficient
polyazaaromatic ligands such as TAP (1,4,5,8-tetraazaphenanthrene) under illumination
are able to form specifically a photoadduct with the guanine nucleobase. This photoreactivity
might be an extremely promising strategy to control the normal cellular process, and
so perturb the gene expression. However, the lack of selectivity of this photoreaction
blocks their therapeutic development. To overcome this, we have realised the attachment
of such metal complexes to the extremity of an oligonucleotide. This approach is based
on the specific recognition of a target nucleotidic sequence by a nucleic acid probe.
In this purpose, we have chosen to use the chemoselective oxime ligation. This coupling
reaction was found to be highly efficient, between both unprotected moieties, with
minimal chemical manipulation and working in physiological conditions. We have built
some conjugate with two complexes of Ru(II) : [Ru(TAP)2Phen]2+ and [Ru(TAP)3]2+, anchoring
at the 3’ or 5’ extremity of the oligonucléotides, in order to determine their photochemical
potentiel. Then under visible illumination, we have demonstrated that the conjugates
produce the specific and irreversible photocrosslinking between a guanine unit of
the target and the ruthenium complex. Finally, we have also decided to extend our
process by anchoring the complex [Ru(TAP)2Phen]2+ to cell-penetrating peptides