Identifiant pérenne de la notice : 247834262
Notice de type
Notice de regroupement
Note publique d'information : Ce travail est un apport nouveau pour la préparation des échantillons biologiques
en vue d'étudier la distribution des ions diffusibles par microscopie SIMS (Spectrométrie
de Masse d'Ions Secondaires). Nous faisons une analyse comparative de cette technique
par rapport aux autres méthodes d'imagerie analytique des distributions des ions inorganiques.
La partie principale du travail concerne la mise au point d'un protocole d'observation
d'échantillons congelés hydratés en SIMS dynamique sous bombardement d'oxygène neutre.
Nous présentons une description du dispositif original permettant la mise en œuvre
de tels échantillons avec un analyseur SIMS IMS 4f. nous faisons une analyse critique
de l'émission secondaire de Na, K, Mg et Ca et des ions de la glace dans les échantillons
congelés. Nous discutons la mesure des coefficients de sensibilité relatifs par rapport
à K après avoir montré que la référence aux ions de la glace était inappropriée pour
les deux modes de congélation étudiés (" Plunge Freezing " et " High Pressure Freezing
"). Nous présentons des images SIMS des distributions ioniques obtenues avec des échantillons
congelés hydratés de lin, de camomille et de lierre. Nous avons mesuré les rapports
de concentration des cations inorganiques dans les vacuoles des cellules d'hypocotyles
de lin et montré qu'il existait une grande diversité dans les contenus ioniques vacuolaires,
même de cellules adjacentes. Ce travail comporte également la mise au point d'un nouveau
protocole de préparation des échantillons biologiques végétaux en phase vapeur. Nous
décrivons une application de ce nouveau protocole à l'étude du rôle du bore chez les
plantes par imagerie SIMS de la distribution des deux isotopes 10B et 11B dans des
cellules d'hypocotyle de lin. Nous montrons que la méthode est applicable à la quantification
simultanée des isotopes du bore chez les végétaux.
Note publique d'information : This work is a new contribution to the preparation of biological samples to study
the distribution of diffusible ions using SIMS microscopy (Secondary Ion Mass Spectrometry).
We compare the capabilities of the SIMS technique for imaging the inorganic cations
with those of the others analytical imaging techniques. The main part of the work
was to develop a new method for the dynamic SIMS analysis of frozen-hydrated samples
under Fast Atom Bombardment (neutral oxygen). We describe the new cold stage built
especially for our IMS 4F SIMS analyser. We show that referencing to the ice characteristic
ions in the measurement of the relative sensitivity factors of Na, K, Mg and Ca cations
gave non reliable results whatever the freezing mode (Plunge Freezing or High Pressure
Freezing). Sensitivity factors relative to K gave, in contrast, results of reasonable
accuracy. We show images of the cations distributions obtained with frozen-hydrated
samples of ivy camomile and flax. We measured the inorganic ions ratios in the vacuoles
of the cells of flax hypocotyl. These measurements revealed a high diversity in ionic
contains of vacuoles even of adjacent cells. We also describe a new sample preparation
method of plant samples without contact with a liquid to prevent the loss of diffusible
species (“vapour phase method”). We used this method to appraise the SIMS applicability
to boron studies in plants. We show that the SIMS technique has the potential for
the simultaneous quantitative detection of the 10B and 11B isotopes in plant cells.
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