Identifiant pérenne de la notice : 247836087
Notice de type
Notice de regroupement
Note publique d'information : L'ensemble de ce travail a permis, grâce à l'utilisation de la technique de potentiel
imposé, de mettre en évidence puis de caractériser, dans l'ovocyte immature de Rana
esculenta, une conductance voltage-dépendante sélective aux protons d'une part et
de mettre en relation l'alcalinisation que l'activation de cette conductance proton
entraîne avec la libération de Ca2+ du réticulum endoplasmique d'autre part. Dans
un premier temps, deux conductances ioniques, activées par les dépolarisations sont
mises en évidence. La première est une conductance potassique, activée pour un potentiel
membranaire au moins égal à -50mV ; elle ne présente pas d'inactivation et est bloquée
par les ions tétraéthylammonium (TEA+). La seconde est une conductance sélective aux
protons. Sa caractérisation électrophysiologique est effectuée en présence de TEA+
(10nM) et de caféine (10mN) afin d'inhiber respectivement les conductances potassique
et chlore Ca2+ dépendante. La conductance proton s'active pour un potentiel membranaire
supérieur à 0 mV et ne présente pas d'inactivation, sa constante de désactivation
pour un potentiel de -60mV étant de 73plus ou moins 21 ms (n=26). Le potentiel d'inversion
du courant proton dépend de l'amplitude et de la durée des dépolarisations ce qui
caractérise l'existence d'un phénomène de déplétion intracellulaire des protons conduisant
à l'alcalinisation du milieu intracellulaire. L'acidification du milieu extracellulaire
ou l'alcalinisation du milieu intracellulaire entraîne une diminution d'amplitude
du courant, un déplacement de son seuil d'activation vers des potentiels plus positifs
et un ralentissement de sa cinétique de désactivation, alors que l'alcalinisation
du milieu extracellulaire ou l'acidification du milieu intracellulaire produit les
effets opposés. Cette conductance proton est bloquée par le Ni2+, le Cd2+, le Zn2+
à la concentration de 1 mM. Dans un second temps, il est montré en présence de TEA+
mais en absence de caféine, que des dépolarisations amenant le potentiel à 20 mV ou
plus permettent le développement d'un courant oscillant de sens sortant s'ajoutant
au courant proton. Ces oscillations ont pour origine l'activation d'une conductance
aux ions chlorure activée par l'élévation du taux de calcium intracellulaire causée
par la libération du calcium contenu dans les réservoirs intracellulaires sensibles
à l'InsP3. Il est aussi montré que l'alcalinisation intracellulaire, engendrée par
l'activation du courant de proton, semble être étroitement liée au déclenchement du
courant de chlore.
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