Note publique d'information : L'objectif de cette thèse, a été tout d'abord, d'essayer de mettre en évidence l'influence
de la femelle donneuse sur la qualité de l'ovocyte chez la vache.Afin d'isoler le
rôle de l'ovocyte dans le taux de développement embryonnaire, l'influence du tractus
génital femelle a été supprimée par collecte des ovocytes dans les follicules (par
Ovum Pick-Up ; OPU) puis par maturation, fécondation et culture in vitro. Ce protocole
expérimental a été appliqué à deux situations physiologiques permettant d'explorer
l'influence maternelle sous plusieurs approches. Tout d'abord, nous avons utilisé
des génisses issues de clonage embryonnaire. Dans un second temps, ce protocole expérimental
a été appliqué à 10 vaches d'origines familiales différentes (non apparentées). Ce
sperme ne pouvait donc pas être considéré comme le facteur limitant du taux de développement.
Nous avons ainsi démontré scientifiquement l'existence d'un effet maternel, c'est-à-dire
d'une influence des facteurs maternels ovocytaires, sur le développement embryonnaire
(in vitro). Ce travail a permis d'isoler des vaches donneuses d'ovocytes de " bonne
" et " mauvaise " qualité. Nos recherches ont ensuite porté sur le(s) mécanisme(s)
pouvant être responsable(s) de ces différences d'aptitude au développement in vitro
entre femelles. Cette recherche a été plus particulièrement axée sur le métabolisme
énergétique : réserves d'ATP, quantité de mitochondries (d'ADN mitochondrial) et séquence
de l'ADN mitochondrial. Seules les mutations de l'ADN mitochondrial ont réellement
permis de différencier les deux phénotypes de qualité ovocytaire.Ces travaux de thèse
ont donné lieu à la rédaction de 3 articles (2 publiés, 1 soumis)
Note publique d'information : The main objective of this thesis was to show the influence that the oocyte donor
cow has over the oocyte quality measured by the embryo production in vitro. In order
to isolate the effect of the oocyte on embryo production, we used the techniques of
ovum pick-up (OPU), in vitro fertilisation (IVF) and culture (IVC) of embryos. These
procedures were used to test the influence of oocytes in two distinct situations.
Initially, the purpose was to test the in vitro embryo production in cloned cows (embryonic
cloning). A second purpose was performed using ten cows with diverse genetic origins.
In order to avoid the sperm induced variation on embryo production, only semen with
good IVF rates from the same bull and from the same ejaculate was used. The results
of this second study demonstrated scientifically the existence of a maternal effect
over in vitro embryo production. This work allowed the identification of cows that
produce oocytes of "good" and "bad" quality. After showing the existence of a maternal
effect over in vitro embryo production, the research focused on the exploration of
mechanisms that could be involved in such differences. Thus, the third experiment
centered on the energetic metabolism of the oocyte, studying the oocytes' ATP reserves
and the quantity of mitochondrial DNA and polymorphisms in the control region of the
mitochondrial DNA. Only the study of mutations of the mitochondrial DNA control region
was successful in differentiating the phenotypic variation in oocyte quality.This
work resulted in the publication of two articles and a third one that was submitted
for publication in international pier-reviewed journals.
paprika.idref.fr
data.idref.fr
Documentation
