Note publique d'information : IN VITRO, LA N-ARGININE (R) DIBASIC (D) CONVERTASE (NRD CONVERTASE ; EC 3.4.24.61
; 140 KDA), METALLOENDOPEPTIDASE DE LA FAMILLE M16 PURIFIEE A PARTIR DU TESTICULE
DE RAT, CLIVE SELECTIVEMENT EN AMONT DE RESIDUS ARGININE INCLUS DANS DES PAIRES D'ACIDES
AMINES BASIQUES. L'ADNC ISOLE CODE POUR UNE PROTEINE QUI SE CARACTERISE PAR UN PEPTIDE
SIGNAL PUTATIF D'ADRESSAGE AU RE, PAR UN DOMAINE ACIDE DE 71 RESIDUS ET LE MOTIF HXXEH.
SON PROFIL D'EXPRESSION AU COURS DE LA SPERMATOGENESE ET SA LOCALISATION AU NIVEAU
DE DEUX STRUCTURES MICROTUBULAIRES DE LA SPERMATIDE AGEE (L'AXONEME ET LA MANCHETTE),
SUGGERENT FORTEMENT QU'ELLE POURRAIT PARTICIPER AU PROCESSUS D'ELONGATION CELLULAIRE.
ELLE EST EGALEMENT SECRETEE PAR LA CELLULE GERMINALE ET PAR LES CELLULES EL4, LIGNEE
CELLULAIRE D'ORIGINE LYMPHOCYTAIRE. LE TRAVAIL PRESENTE DANS CE MANUSCRIT RAPPORTE
: (I) LE CLONAGE DE L'ADNC DE L'ENZYME HUMAINE ET L'IDENTIFICATION DE DEUX ESPECES
MOLECULAIRES, LE PREMIER TRANSCRIT, HNRD1, EST EQUIVALENT A CELUI PRECEDEMMENT CARACTERISE
CHEZ LE RAT ALORS QUE LE SECOND, HNRD2, SE DISTINGUE PAR UNE INSERTION DE 204 NUCLEOTIDES.
CE DERNIER, BIEN QUE MOINS REPRESENTE DANS LE TESTICULE DE RAT, A EGALEMENT ETE CARACTERISE.
LA PROTEINE CORRESPONDANTE, NRD2 CONVERTASE, PRESENTE DONC UN SEGMENT ADDITIONNEL
DE 68 RESIDUS POSITIONNE ENTRE LE DOMAINE ACIDE ET LE MOTIF HXXEH. LES STRUCTURES
PRIMAIRES DES PROTEINES HUMAINES ET DE RAT SONT FORTEMENT CONSERVEES (92% IDENTITE).
(II) LA DISTRIBUTION TISSULAIRE ET CELLULAIRE DES TRANSCRITS NRD ANALYSEE PAR NORTHERN
BLOT, BIEN QUE LE TESTICULE SOIT LE SITE PRINCIPAL DE LEUR EXPRESSION, ILS SONT LARGEMENT
EXPRIMES, ET L'EXPRESSION DE LA NRD2 CONVERTASE N'EST PAS RESTREINTE A CE TISSU. (III)
L'ANALYSE COMPAREE DES PROPRIETES BIOCHIMIQUES ET ENZYMATIQUES DES DEUX ISOFORMES
SUREXPRIMEES AINSI QUE LEUR LOCALISATION SUBCELLULAIRE. SIMILAIRES ET COMPARABLES
A L'ENZYME PURIFIEE DU TESTICULE DE RAT, LES DEUX ISOFORMES NE SE SONT DISTINGUEES
QUE PAR LEUR STABILITE RELATIVE. BIEN QUE LEUR SPECIFICITE DE CLIVAGE EVOQUE CELLE
D'ENZYMES DE LA VOIE DE SECRETION, ELLES SONT PRINCIPALEMENT LOCALISEES DANS LE CYTOPLASME
DES CELLULES QUI LES SUREXPRIMENT. LA NRD CONVERTASE SEMBLE DONC ETRE UNE ENDOPEPTIDASE
CYTOPLASMIQUE. LES MECANISMES CONDUISANT A SA SECRETION AINSI QUE SES SUBSTRATS IN
VIVO RESTENT A DETERMINER.