Identifiant pérenne de la notice : 247841315
Notice de type
Notice de regroupement
Note publique d'information : LES CELLULES SOUCHES EMBRYONNAIRES (CELLULES ES) SONT DES CELLULES PLURIPOTENTES CAPABLES
DE COLONISER LA LIGNEE GERMINALE D'UN EMBRYON HOTE. CES PROPRIETES FONT DES CELLULES
ES UN MODELE UNIQUE POUR L'ETUDE DE LA DIFFERENCIATION ET DE LA PROLIFERATION. CEPENDANT,
CE MODELE EST LIMITE PAR L'ABSENCE DE SYSTEME D'EXPRESSION INDUCTIBLE EFFICACE PERMETTANT
DE CONTROLER L'EXPRESSION D'UN GENE D'INTERET. POUR PALLIER A CET INCONVENIENT, NOUS
AVONS DEVELOPPE DANS LES CELLULES ES UN SYSTEME BASE SUR LA RECOMBINASE CRE-ERT2 INDUCTIBLE
PAR LE TAMOXIFENE (TAX) ET SUR UNE NOUVELLE TECHNIQUE D'EXPRESSION APPELEE GENE TRAP
EXPRESSION (GTE). LE GTE REPOSE SUR DES VECTEURS DI-CISTRONIQUES QUI PERMETTENT D'OBTENIR
UNE EXPRESSION FORTE, STABLE, ET HOMOGENE DU GENE D'INTERET EN PIEGEANT LES PROPRIETES
D'EXPRESSION D'UN GENE ENDOGENE. NOUS AVONS INTRODUIT DANS LES CELLULES ES DEUX VECTEURS
DE GTE CODANT POUR (I) LA PROTEINE FUSION GEO ET POUR LA CRE-ERT2 ET (II) LA PROTEINE
HYGROMYCINE ET L'ALCALINE PHOSPHATASE HUMAINE (APH). L'EXPRESSION DE L'APH EST BLOQUEE
PAR UNE SEQUENCE D'ARRET DE TRANSCRIPTION ENCADREE PAR DES SITES LOXP. L'ACTIVATION
DE LA CRE-ERT2 PAR LE TAX PERMET L'EXPRESSION DE L'APH EN INDUISANT UNE DELETION DE
CETTE SEQUENCE PAR RECOMBINAISON AU NIVEAU DES SITES LOXP. NOUS AVONS MONTRE QUE L'APH
EST INDETECTABLE EN ABSENCE DE TAX. A L'INVERSE, LE PRESENCE DE TAX INDUIT UNE EXPRESSION
FORTE ET HOMOGENE DANS 100% DES CELLULES ES INDIFFERENCIEES OU DIFFERENCIEES. NOUS
AVONS OBTENU DES RESULTATS IDENTIQUES IN VIVO AU COURS DES PREMIERS STADES DU DEVELOPPEMENT
EN UTILISANT LES TECHNIQUES DE TRANSGENESE BASEES SUR LES CELLULES ES. LES CARACTERISTIQUES
DE CE SYSTEME INDUCTIBLE DEVRAIENT PERMETTRE DE CONTROLER L'EXPRESSION DE DIFFERENTES
PROTEINES DANS LES CELLULES ES, Y COMPRIS DES FACTEURS DE DIFFERENCIATION DONT L'EXPRESSION
CONTROLEE SERVIRA A ORIENTER LA DIFFERENCIATION DES CELLULES ES DANS UN TYPE CELLULAIRE
HOMOGENE CE QUI EST ACTUELLEMENT IMPOSSIBLE.
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Documentation
