Identifiant pérenne de la notice : 247672033
Notice de type
Notice de regroupement
Note publique d'information : La spermatogenèse est un processus finement régulé de multiplication et de différenciation
cellulaire, conduisant à la production de gamètes mâles au niveau de l'épithélium
séminifère du testicule. La mise au point d'un système de culture, permettant aux
cellules germinales de réaliser l'étape méiotique de la spermatogenèse in vitro, était
l'objectif principal de cette thèse. Des cultures de tubes séminifères ont été réalisées
à partir de rats Wistar prépubères, dans des chambres bicamérales permettant de reproduire
partiellement la polarité des cellules testiculaires. Le passage de la méiose a été
caractérisé grâce a : - l'expression de gènes spécifiques de certaines étapes de la
méiose par RT-PCR quantitative relative ; - l'identification des différents types
cellulaires en culture en microscopie électronique à transmission ; - la mise en évidence
des spermatides par immunocytochimie grâce à un anticorps dirigé spécifiquement contre
une protéine acrosomique ; - la détermination de la ploïdie des cellules ; - l'utilisation
du BrDU pour suivre la progression des cellules germinales in vitro. Il a été montré,
au cours de cultures réalisées à partir d'animaux de 20-22 jours, que des spermatocytes
primaires leptotène sont capables de se différencier in vitro jusqu'au stade de spermatide
ronde. Pour la première fois, l'étape méiotique de la spermatogenèse est réalisée
entièrement en culture, à partir de cellules germinales mâles de mammifères. Une étude
comparative de la cinétique de différenciation a été réalisée in vitro et in vivo.
Ce travail offre de nouvelles perspectives dans le domaine de la compréhension de
la méiose. Il devrait permettre de mettre au point de nouvelles approches dans le
domaine de la stérilité masculine ou de la contraception. En outre, la possibilité
de produire en culture des cellules germinales dont l'état de différenciation devrait
autoriser une fécondation in vitro, pourrait ouvrir les portes de la transgénèse chez
les espèces domestiques.